文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 细胞培养

1.3 细胞转染

1.4 CCK8法检测细胞增殖

1.5 Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭

1.6 双荧光素酶报告基因实验

1.7 qRT-PCR

1.8 流式细胞术检测细胞凋亡

1.9 Western blot

1.10 统计学分析

2 结果

2.1 miR-409-3p在小细胞肺癌中低表达

2.2 miR-409-3p调控小细胞肺癌细胞的增殖能力和凋亡水平

2.3 miR-409-3p抑制小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭

2.4 miR-409-3p靶向抑制Beclin-1表达

2.5 miR-409-3p抑制Beclin-1表达而调控小细胞肺癌细胞的增殖和凋亡能力

2.6 miR-409-3p抑制Beclin-1表达而抑制小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭

2.7 miR-409-3p调控Beclin-1而抑制小细胞肺癌细胞的自噬

3 讨论

文章摘要:目的:探究miR-409-3p及其靶基因对小细胞肺癌细胞自噬、生长和转移的影响。方法:qRT-PCR检测miR-409-3p在HPAEpiC、SBC-5、NCI-H446、HOP-92细胞中的表达,SBC-5细胞中转染miR-409-3p mimic和miR-NC,CCK8法检测转染后细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,双荧光素酶报告基因实验检测miR-409-3p和Beclin-1的靶向结合,SBC-5细胞中转染miR-409-3p mimic后转染Beclin-1过表达质粒（miR-409-3p mimic+Beclin-1）,然后检测各组细胞增殖、迁移、侵袭和细胞凋亡水平。Western blot检测各组细胞中Beclin-1、LC3-Ⅱ、p62的表达。结果:miR-409-3p在SBC-5、NCI-H446、HOP-92细胞中的表达显著低于HPAEpiC细胞。miR-409-3p mimic组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著低于miR-NC组,凋亡水平显著高于miR-NC组。双荧光素酶报告基因实验检测结果显示miR-409-3p靶向结合Beclin-1。miR-409-3p mimic+Beclin-1组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著高于miR-409-3p mimic组,细胞凋亡水平显著低于miR-409-3p mimic组。miR-409-3p mimic组细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ表达显著低于miR-NC组,p62表达显著高于miR-NC组。miR-409-3p mimic+Beclin-1组细胞LC3-Ⅱ表达显著高于miR-409-3p mimic组,p62表达显著低于miR-409-3p mimic组。结论:miR-409-3p调控靶基因Beclin-1抑制SBC-5细胞生长和转移,其机制可能为抑制小细胞肺癌细胞的自噬。

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