文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

    1.2.1 细胞培养

    1.2.2 含药血清的制备

    1.2.3 HK2与肺癌患者预后生信分析

    1.2.4 划痕实验检测JHJRMS对肺癌细胞侵袭迁移能力的影响

    1.2.5RT-PCR检测JHJRMS对miR-143-3p表达的影响

    1.2.6 Western blot检测JHJRMS对肺癌细胞中HK2蛋白表达的影响

    1.2.7 乳酸生成速率测定

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 HK2与肺癌患者预后之间的相关性

2.2 JHJRMS对肺癌细胞侵袭转移能力的影响

2.3 JHJRMS对肺癌细胞中HK2蛋白以及侵袭转移相关蛋白表达的影响

2.4 JHJRMS可显著增强mi R-143-3p在肺癌细胞中的表达同时降低乳酸的生成

2.5 mi R-143-3p靶向调控HK2蛋白的有效结合位点及相关评分

3 讨论

文章摘要:目的:研究健脾化瘀解毒方的含药血清（JHJRMS）对人肺癌细胞能量代谢的影响。方法:TCGA数据库分析己糖激酶2（HK2）与肺癌患者预后之间的相关性;划痕实验用来检测JHJRMS对肺癌细胞侵袭转移的影响。RT-PCR检测JHJRMS对肺癌细胞中miR-143-3p表达水平的影响。数据库预测miR-143-3p与HK2蛋白的相关性。Western blot检测JHJRMS对肺癌细胞HK2、E-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白的影响。结果:TCGA数据库结果显示,HK2低表达,肺癌患者具有更好的预后。划痕实验结果显示JHJRMS能显著抑制肺癌细胞的侵袭转移。RT-PCR结果显示JHJRMS可明显增加肺癌细胞中miR-143-3p的表达水平。数据库结果提示,miR-143-3p和蛋白HK2的mRNA存在多处互补链,miR-143-3p可能靶向调控HK2。Western blot结果显示JHJRMS处理肺癌细胞后,细胞中的HK2、E-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低。结论:JHJRMS能明显抑制人肺癌A549细胞的侵袭转移,其机制可能是通过miR-143-3p调控HK2的表达水平直接影响细胞的能量代谢过程。

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